姬松茸的建堆發酵與雙孢蘑菇一樣。將稻草、秸稈等或棉籽皮浸透水后與畜禽糞等分層鋪撒均勻建堆，一般建堆上寬1.2米，下寬1.5米，高1.3米。堆料后的3～4天，堆溫通常可達70℃左右。堆溫的測定一般以圓柱形溫度計插入料堆深約33厘米處為標準。5～7天后，堆溫就會下降，此時應翻堆。翻堆的目的是改善料層的空氣條件，散發堆內的廢氣，調整料堆的水分，同時添加化肥和石膏粉，改善發酵條件，讓微生物繼續生長繁殖，更好地促使堆溫回升，加速糞草分解，達到均勻腐熟。
第一次翻堆時加入尿素、硫酸銨等化肥并充分攪拌勻，在微生物的作用下，通過發酵變成適合姬松茸的氮源。5天后進行第二次翻堆，再按4天、3天的間隔翻堆5次， 共發酵24天左右。為了使堆料發酵均勻，翻堆時應把中間培養料翻到外面，把外層培養料堆進中間。發酵后培養料以達到棕褐色，手拉纖維易斷為度。堆制發酵后培養料含水量約為60%～75%，手抓一把培養料用力擠，指縫有二三滴水即為含水量適宜。將pH值調至9。為了制作均勻、完全成熟、高質量的培養料，翻堆非常重要，這是姬松茸產量高低的先決條件。
